凯氏定氮仪,细胞培养实验—蛋白质检测的方法

时间:2019/4/26 9:47:57 浏览:

蛋白质的理化性质及反应众多,光是显色反应就达十余种,每一种或一类性质就意味着一条检测途径,因此能够用于蛋白质检测的方法多种多样。在众多的蛋白质含量常规检测方法当中,历史最长、最为成熟的两种方法是基于氮元素含量测定的凯氏定氮法和燃烧定氮法;发展速度最快、无需样品预处理的快速检测方法首推近红外光谱法;应用最为广泛、实现最为灵活的是基于显色反应的比色法;能够对不同结构和大小的蛋白质分子进行分离检测的主要有高效液相色谱法、毛细管凝胶电泳。此外,还有其它一些不常用或是非常规的方法也可用于蛋白质含量的检测。凯氏定氮仪凯氏定氮法:凯氏定氮法是丹麦化学家Kjeldahl1883年提出的,历经一个多世纪的发展后已逐步趋于成熟和完善。Kjeldahl发明凯氏定氮法的最初目的是检测啤酒原料谷物中蛋白质的含量,后经多次改进检测过程不断简化、检测结果的重现性和可靠性逐步提高,最终被人们所广泛采用。目前凯氏定氮法已成为众多国家和组织机构检测蛋白质的标准方法,被各领域学者和研究人员应用于蛋白质的检测之中。凯氏定氮法的测量原理:凯氏定氮法主要基于蛋白质中氮元素含量大致为16%这一原理,虽然在不同的时期具体实现细节上略有不同,但大致都分为消化、蒸馏和滴定三大步骤。



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